RRS1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-409839

Panoramica

RRS1 (omologo del regolatore della biogenesi dei ribosomi) è una proteina nucleolare conservata, essenziale per la maturazione e l’esportazione della subunità ribosomiale 60S grazie ai suoi ruoli nella processazione del pre-rRNA e nell’assemblaggio dei precursori della subunità grande. Interagisce con fattori della biogenesi ribosomiale e contribuisce all’organizzazione del nucleolo, collegando la capacità di traduzione alla crescita cellulare e alla progressione del ciclo cellulare. L’alterazione della produzione di ribosomi può attivare la segnalazione di stress nucleolare e modificare i checkpoint dipendenti da p53, rendendo RRS1 un nodo utile per studiare la proteostasi e il controllo della crescita. La regolazione anomala delle vie di biogenesi ribosomiale, incluse componenti come RRS1, è frequentemente associata a fenotipi proliferativi ed è rilevante per studi meccanicistici in biologia del cancro e nelle ribosomopatie correlate.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RRS1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RRS1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RRS1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RRS1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RRS1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RRS1 per lo studio della segnalazione di RRS1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni RRS1 critici per la funzione di RRS1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RRS1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal RRS1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RRS1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RRS1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal RRS1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RRS1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RRS1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RRS1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.