Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Rrn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403709
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rrn3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rrn3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rrn3 Anticorpo (D-9): sc-390464
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rrn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403709 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RRN3 codifica a Rrn3, um fator de transcrição associado à Pol I que ajuda a recrutar a RNA polimerase I para o DNA ribossômico e sustenta a síntese de pré-rRNA, conectando sinais de crescimento à biogênese de ribossomos. A atividade de Rrn3 é regulada por vias de sinalização responsivas a nutrientes e ao estresse, incluindo o controle dependente de mTOR da iniciação pela Pol I, e contribui para a função nucleolar e a proteostase ao governar a produção de rRNA. Como a transcrição de rDNA é estreitamente acoplada à proliferação e à adaptação celular ao estresse, alterações na dinâmica RRN3–Pol I são estudadas em contextos de crescimento desregulado, instabilidade genômica e fenótipos de estresse nucleolar. Assim, RRN3 é relevante para investigar como a biogênese ribossomal se articula com o controle do ciclo celular e a reprogramação metabólica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rrn3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RRN3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RRN3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RRN3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rrn3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RRN3 para a investigação da sinalização de Rrn3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RRN3 críticos para a função Rrn3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RRN3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rrn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rrn3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RRN3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rrn3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rrn3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RRN3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RRN3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.