RPGR Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-404441-ACT
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RPGRO plasmídeo de ativação de CRISPR (h)e um mediador da ativação sinergética (SAM) dentro do sistema de ativada da transcrição, criado para a especificamente fazer a regulação genética crescente
- RPGR Plasmídeo de ativação CRISPR (h) consiste em 3 pares de plasmídeos com a razão de massa de 1:1:1: um plasmídeo contento o código para Cas9 desativada
- O complexo SAM resultante se liga a uma região especifica a qual contem aproximadamente 200-250 nt na região upstream da região de inicio da transcrição e fornece um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética.
- Os gRNAs codificados pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR RPGR (h) e pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR RPGR (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas a montante do local de início da transcrição de RPGR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RPGR Plasmídeo de ativação de CRISPR (h) | sc-404441-ACT | 20 µg | $397.00 |
O RPGR humano (regulador de GTPase da retinite pigmentosa) localiza-se predominantemente no cílio de conexão dos fotorreceptores e em compartimentos associados ao centrosoma/corpo basal, onde dá suporte ao tráfego de proteínas ciliares e ao transporte baseado em microtúbulos. Por meio de interações com a maquinaria de transporte ciliar e de transporte intraflagelar, o RPGR ajuda a manter a integridade do segmento externo e a homeostase dos fotorreceptores. A disrupção de processos ciliares dependentes de RPGR está fortemente associada a fenótipos de degeneração retiniana, incluindo a retinite pigmentosa ligada ao X e distrofias retinianas hereditárias relacionadas, destacando sua relevância para a biologia de cílios sensoriais.
RPGR O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de RPGR sem alterar a sequência de ADN subjacente.
RPGR O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus RPGR em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição RPGR, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de RPGR. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus RPGR nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de RPGR no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via RPGR em células tumorais com expressão de RPGR silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.