RNF146 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417152-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF146O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF146 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF146 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF146. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF146 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF146 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF146 codifica uma ligase E3 de ubiquitina (também conhecida como Iduna) que reconhece poli(ADP-ribose) e acopla sinais dependentes de PARP à degradação proteassomal mediada por ubiquitina. Ela participa das vias de resposta a danos no DNA e de estresse replicativo ao promover a degradação de substratos PARilados, como a axina, conectando-se assim à sinalização Wnt/β-catenina e à homeostase celular. Por meio da regulação de programas de morte celular ligados à PARilação e da manutenção do genoma, a RNF146 é estudada em contextos de remodelação de vias associadas ao câncer e de respostas ao estresse relacionadas à neurodegeneração. Sua atividade integra a sinalização de PARP, a dinâmica do sistema ubiquitina-proteassoma e programas transcricionais que influenciam proliferação e sobrevivência.
RNF146 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF146 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF146. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF146. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF146 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.