Rnd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406603

Visão geral

RND1 codifica a Rnd1, uma pequena GTPase atípica da família Rho que permanece constitutivamente ligada ao GTP e atua principalmente como reguladora da organização do citoesqueleto de actina e da adesão celular. A sinalização de Rnd1 antagoniza a contratilidade dependente de RhoA/ROCK, influenciando a formação de fibras de estresse, a dinâmica de adesões focais e o arredondamento celular, com efeitos a jusante sobre a migração e o crescimento de neuritos. Por meio de crosstalk com a sinalização de integrinas e vias de remodelamento do citoesqueleto, Rnd1 ajuda a coordenar mudanças na morfologia celular durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual. A alteração da expressão de RND1 ou desequilíbrios nessa via têm sido associados a fenótipos de motilidade e invasão desregulados na biologia do câncer, bem como a perturbações em processos neuronais e vasculares estudados em modelos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rnd1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RND1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RND1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RND1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rnd1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RND1 para a investigação da sinalização de Rnd1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RND1 críticos para a função Rnd1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RND1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Rnd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rnd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RND1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Rnd1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rnd1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RND1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RND1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.