Rlf CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-410980

概要

RLF（RLF zinc finger）は、クロマチンおよび制御DNAエレメントとの相互作用を介した転写制御に関与するとされる、核内のDNA結合タンパク質Rlfをコードしています。Rlfは亜鉛フィンガーモチーフを有しており、細胞周期の進行、分化、ならびに細胞アイデンティティの維持に影響する遺伝子発現プログラムの制御に関わる役割と整合的です。RLFが関与する転写ネットワークの制御異常は、増殖制御の破綻や、疾患の生物学に関連するその他の遺伝子発現異常と関連づけられており、ヒト細胞における機序解析研究の有用な標的となります。

Rlf CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRLF遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RLF内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RLFのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Rlfタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Rlfシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RLF欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Rlfの機能に不可欠なRLFエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RLFゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Rlf CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRlf CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RLF遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Rlf HDRプラスミド（h）および Rlf HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRLFホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRLF標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。