Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
RIP/Rab Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420946
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RIP/Rab O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RIP/Rab, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RIP/Rab Anticorpo (H-2): sc-166651
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RIP/Rab Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420946 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Agfg1 codifica RIP/Rab, uma ArfGAP que acopla a sinalização do fator de ADP-ribosilação ao tráfego endocítico de membranas e à organização do citoesqueleto. Por meio da regulação dos ciclos de pequenas GTPases, RIP/Rab contribui para a internalização de receptores, o brotamento de vesículas e a reciclagem de endossomos para a membrana plasmática, processos que influenciam os resultados da sinalização por fatores de crescimento. A perturbação desses nós de tráfego pode alterar a polaridade celular, a migração e as respostas ao estresse, relacionando vias dependentes de Agfg1 a fenótipos relevantes para a neurobiologia e para o comportamento de células cancerosas em sistemas modelo. Assim, em estudos com camundongos, Agfg1 é útil para investigar como o tráfego de membranas se cruza com a transdução de sinais e a homeostase celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RIP/Rab (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Agfg1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Agfg1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Agfg1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RIP/Rab.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Agfg1 para a investigação da sinalização de RIP/Rab, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Agfg1 críticos para a função RIP/Rab
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Agfg1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RIP/Rab Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo RIP/Rab Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Agfg1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RIP/Rab Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR RIP/Rab (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Agfg1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Agfg1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.