RIOK2 Double Nickaseプラスミド (m): sc-426346-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- RIOK2 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- RIOK2ダブルニカースプラスミド（m）およびRIOK2ダブルニカースプラスミド（m2）は、Riok2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
RIOK2 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-426346-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RIOK2 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-426346-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Riok2はRIOK2をコードしており、RIOK2は非典型的なセリン／スレオニンキナーゼで、40Sリボソームサブユニットの細胞質での後期成熟において必須の組立因子として機能します。RIOK2は、pre-rRNAのプロセシングと品質管理を、pre-40S因子の放出・再利用と協調させることでリボソーム生合成に関与し、翻訳能を細胞の成長・増殖プログラムと結び付けています。リボソーム産生は細胞周期制御や細胞ストレス応答と緊密に統合されているため、RIOK2の機能が乱れると、プロテオスタシスや全体的な翻訳出力が変化し得ます。リボソーム生合成経路の破綻は発生異常や増殖性疾患の病態に広く関与することから、RIOK2は成長制御の機構研究に有用な結節点となります。
RIOK2 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Riok2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Riok2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Riok2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Riok2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。