Ring1b Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404633-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ring1bO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ring1b (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ring1b (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RING1B Anticorpo (N-32): sc-101109
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ring1b Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404633-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ring1b Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404633-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF2 codifica a Ring1b, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING finger que forma o núcleo catalítico do complexo repressivo Polycomb 1 (PRC1). A Ring1b monoubiquitina a histona H2A na Lys119, reforçando a compactação da cromatina mediada por Polycomb e a repressão transcricional durante o desenvolvimento e a especificação de linhagens celulares. Em coordenação com a metilação de H3K27 dependente de PRC2 e outros reguladores epigenéticos, a RNF2 ajuda a controlar programas do ciclo celular, estados de diferenciação e respostas a danos no DNA. A atividade desregulada de RNF2 e a sinalização de PRC1 estão implicadas em redes transcricionais alteradas observadas em diversos tipos de câncer e em outras doenças associadas à desregulação epigenética.
Ring1b O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.