RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406740

概要

RIMBP2は、RIM-BP2（RIM結合タンパク質2）をコードしており、RIMタンパク質や他のシナプス構成要素との相互作用を介して、電位依存性Ca2+チャネルを神経伝達物質放出機構に結び付ける、シナプス前終末のアクティブゾーンに存在する足場タンパク質です。Ca2+流入をシナプス小胞のドッキングおよびプライミングと整合させることで、RIM-BP2は興奮性シナプスにおける活動電位誘発性エキソサイトーシスと短期シナプス可塑性を効率的に支えます。このタンパク質はシナプス前終末でのCa2+依存性シグナル伝達に関与し、シナプス強度を規定する小胞サイクリング動態にも影響を与えます。RIMBP2の遺伝学的な攪乱は神経発達および神経精神疾患関連の表現型と関連付けられており、シナプス伝達の異常や回路レベルの機能障害を研究する上で重要です。

RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRIMBP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RIMBP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RIMBP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RIM-BP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RIM-BP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RIMBP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RIM-BP2の機能に不可欠なRIMBP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RIMBP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RIM-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRIM-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RIMBP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RIM-BP2 HDRプラスミド（h）および RIM-BP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRIMBP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRIMBP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。