Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RIG-I双切口酶质粒(h): sc-400812-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RIG-I 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- RIG-I双切酶质粒（h）和RIG-I双切酶质粒（h2）编码针对DDX58的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：RIG-I: sc-376845，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RIG-I双切口酶质粒(h) | sc-400812-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RIG-I双切口酶质粒(h2) | sc-400812-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX58 编码 RIG-I，这是一种位于胞质中的 DExD/H-box RNA 解旋酶，可识别病毒 RNA 的特征（如 5′-三磷酸末端和短双链 RNA），从而启动先天免疫信号传导。与配体结合后，RIG-I 在细胞线粒体上与 MAVS 结合，激活 TBK1/IKKε 以及 IKK 复合体，进而驱动 IRF3/IRF7 和 NF-κB 依赖的转录，诱导 I 型干扰素与促炎性细胞因子的表达。该通路塑造抗病毒限制、细胞因子程序，并与凋亡和自噬发生串话；而 RIG-I 信号失调已被认为与干扰素驱动的炎症状态、自身免疫以及肿瘤免疫微环境表型相关。RIG-I 也常用于研究病原体感知、与 RNA 代谢相关的应激反应，以及病毒免疫逃逸机制。
RIG-I 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DDX58 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DDX58内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DDX58的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DDX58基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。