Ribosomal Protein L22L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402323

Visão geral

O RPL22L1 codifica a Proteína Ribossomal L22L1, um componente da subunidade grande 60S do ribossomo que dá suporte à biogênese ribossomal e à tradução eficiente de mRNA. Por meio de sua contribuição para o controle translacional, o RPL22L1 pode influenciar a proteostase, a progressão do ciclo celular e programas de adaptação ao estresse que dependem do recrutamento seletivo de mRNAs e da função ribossomal. A regulação alterada de proteínas ribossomais e de fatores de montagem do ribossomo é frequentemente associada a programas de crescimento desregulados e a vias de manutenção do genoma, tornando o RPL22L1 relevante para estudos de vulnerabilidades associadas ao ribossomo em estados proliferativos. Assim, este gene é de interesse para trabalhos mecanísticos que conectam a capacidade translacional à homeostase celular e a fenótipos associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein L22L1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RPL22L1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RPL22L1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RPL22L1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ribosomal Protein L22L1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RPL22L1 para a investigação da sinalização de Ribosomal Protein L22L1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RPL22L1 críticos para a função Ribosomal Protein L22L1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RPL22L1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ribosomal Protein L22L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ribosomal Protein L22L1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RPL22L1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ribosomal Protein L22L1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ribosomal Protein L22L1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RPL22L1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RPL22L1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.