Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RELA/NFκB p65 Double Nickaseプラスミド (m): sc-422642-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- RELA/NFκB p65 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- RELA/NFκB p65ダブルニカースプラスミド（m）およびRELA/NFκB p65ダブルニカースプラスミド（m2）は、Relaを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: RELA/NFκB p65 抗体 (F-6): sc-8008
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
RELA/NFκB p65 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-422642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RELA/NFκB p65 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-422642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスRelaは、RELA／NF-κB p65サブユニットをコードしており、NF-κB1（p50）と複合体を形成して刺激応答性遺伝子の発現を制御する、正統（canonical）NF-κBシグナル伝達の中心的な転写制御因子である。RELAは、TNF受容体、IL-1/TLR、抗原受容体、DNA損傷経路からの入力を統合し、炎症性サイトカイン、ケモカイン、接着分子、細胞生存プログラム、自然免疫のエフェクター遺伝子を協調的に制御する。その活性は、IκBによる隔離と、IKKによるリン酸化に続く核移行およびクロマチン結合によって厳密に調節されている。RELAシグナルの破綻は、アポトーシス抵抗性の変化や炎症性微小環境の再構築を介して、慢性炎症、自己免疫、感染応答、腫瘍化プロセスに広く関与するとされる。
RELA/NFκB p65 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Rela 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Rela内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Relaの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Relaが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。