Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RecQL4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429775-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RecQL4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RecQL4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase RecQL4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Recql4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RecQL4 Anticorpo (B-3): sc-518189
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RecQL4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429775-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Recql4 de camundongo codifica a helicase RecQL4, um membro da família RecQ que sustenta a manutenção do genoma durante a replicação e o reparo do DNA. A RecQL4 participa do disparo de origens de replicação e da ressecção das extremidades do DNA, e contribui para vias como recombinação homóloga, junção de extremidades não homólogas e reparo por excisão de base, limitando o estresse replicativo e a instabilidade cromossômica. A perda ou disfunção de RECQL4 está associada a síndromes hereditárias de instabilidade genômica e a fenótipos de predisposição ao câncer, o que a torna um alvo útil para estudar sinalização de dano ao DNA, controle de checkpoints e reparo de quebras associado à replicação. A perturbação de Recql4 é comumente usada para investigar como o reinício da forquilha impulsionado por helicases e a escolha da via de reparo influenciam o destino celular sob estresse genotóxico.
RecQL4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Recql4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Recql4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Recql4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Recql4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.