RBM35B Plasmide Double Nickase (h): sc-408008-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RBM35B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RBM35B Double Nickase Plasmid (h) e il RBM35B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ESRP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RBM35B Plasmide Double Nickase (h) | sc-408008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM35B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ESRP2 (RBM35B) è una proteina legante l’RNA specifica dell’epitelio che regola programmi di splicing alternativo del pre‑mRNA coinvolti nella polarità cellulare, nell’adesione e nella differenziazione. Modulando l’inclusione degli esoni in reti collegate alla transizione epitelio‑mesenchimale (EMT), ESRP2 contribuisce a mantenere l’identità epiteliale e influenza gli output di segnalazione di vie quali quelle delle tirosin-chinasi recettoriali e le risposte trascrizionali associate a TGF‑β. Un’espressione o un’attività di splicing di ESRP2 deregolate sono state associate a un uso alterato delle isoforme in modelli di progressione legati al cancro e a perturbazioni dello sviluppo epiteliale e della funzione di barriera. In quanto regolatore dello splicing, ESRP2 offre un punto d’accesso meccanicistico per studiare fenotipi dipendenti dalle isoforme, il rimodellamento del trascrittoma e difetti di processamento dell’RNA in sistemi cellulari umani.
RBM35B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ESRP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ESRP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ESRP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ESRP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.