Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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RbAp46 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405076
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RbAp46 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RbAp46, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RbAp46 Anticorpo (E-9): sc-377197
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RbAp46 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405076 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RBBP7 codifica a RbAp46, uma proteína de ligação a histonas com repetições WD40 que atua como componente central de múltiplos complexos reguladores da cromatina, incluindo NuRD/HDAC, Sin3A e PRC2, e se associa ao CAF-1 durante a montagem de nucleossomos. Por meio dessas interações, a RbAp46 ajuda a coordenar a desacetilação de histonas, o remodelamento da cromatina e o silenciamento epigenético de genes, impactando programas de transcrição, a montagem de cromatina acoplada à replicação do DNA e a estabilidade do genoma. Alterações na regulação da cromatina dependente de RBBP7 têm sido associadas à proliferação desregulada, defeitos de diferenciação e fenótipos de resposta ao estresse observados em diferentes contextos de câncer e doenças do desenvolvimento. Como um fator nodal da cromatina, a RbAp46 é frequentemente estudada em vias que controlam a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a transcrição específica de linhagem.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RbAp46 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RBBP7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RBBP7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RBBP7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RbAp46.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RBBP7 para a investigação da sinalização de RbAp46, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RBBP7 críticos para a função RbAp46
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RBBP7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RbAp46 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RbAp46 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RBBP7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RbAp46 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RbAp46 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RBBP7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RBBP7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.