Ran BP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422595

Descripción general

Ranbp1 codifica la proteína 1 de unión a Ran (Ran BP-1), un regulador conservado del ciclo de la GTPasa Ran que coordina el transporte nucleocitoplasmático al modular la dinámica RanGTP/RanGDP. Mediante su interacción con Ran y con procesos dependientes de RCC1/RanGAP, Ran BP-1 contribuye a la importación y exportación nuclear, al ensamblaje del huso y a la progresión mitótica, vinculando el control del transporte con la fidelidad del ciclo celular. La alteración de la vía de Ran puede comprometer la estabilidad del genoma y la proliferación, lo que hace que la función de Ranbp1 sea relevante en estudios de defectos del desarrollo y transformación oncogénica. En sistemas murinos, Ran BP-1 se examina con frecuencia en el contexto de la señalización dependiente del transporte nuclear y de fenotipos de división celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ran BP-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ranbp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ranbp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ranbp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ran BP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ranbp1 para la investigación de la señalización de Ran BP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ranbp1 críticos para la función de Ran BP-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ranbp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ran BP-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Ran BP-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ranbp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ran BP-1 (m) y el plásmido HDR Ran BP-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ranbp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ranbp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.