Rag C CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424807

개요

Rragc는 리소좀에 존재하는 소형 GTPase인 Rag C를 암호화하며, Rag C는 RagA 또는 RagB와 이합체를 형성해 세포 내 아미노산 가용성을 리소좀에서의 mTORC1 모집(recruitment) 및 활성화와 연결합니다. Rag C는 Ragulator 복합체 및 하위 mTORC1 효과기들과의 상호작용을 통해 영양 신호에 반응하여 단백질 합성, 자가포식, 리소좀 생합성, 대사 재프로그래밍 조절에 관여합니다. Rag GTPase 신호전달이 비정상적으로 조절되면 영양 감지 체크포인트가 교란될 수 있으며, 증식 조절, 면역세포 기능, 세포 스트레스 적응과 관련된 표현형과 연관된 것으로 보고되어 왔습니다. 마우스 시스템에서 Rag C는 발달 및 질환 관련 맥락 전반에 걸쳐 mTOR 구동 성장과 이화작용 균형에 대한 기전적 연구를 뒷받침합니다.

Rag C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rragc 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rragc 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rragc의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Rag C 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Rag C 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rragc 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Rag C 기능에 중요한 Rragc 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rragc 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Rag C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Rag C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rragc 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Rag C HDR 플라스미드 (m) 및 Rag C HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rragc 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rragc 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.