Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Raftlin-2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-414360
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Raftlin-2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Raftlin-2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Raftlin-2 Antibody (F-7): sc-514540
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Raftlin-2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-414360 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
RFTN2 codifica Raftlin-2, una proteina scaffold associata ai lipid raft che contribuisce a organizzare i microdomini di membrana coinvolti nella segnalazione dei recettori immunitari. Raftlin-2 supporta il traffico e la stabilizzazione dei complessi di segnalazione nelle cellule linfoidi, contribuendo agli eventi prossimali al recettore delle cellule B, alle cascate chinasiche a valle e all’endocitosi regolata. Grazie al suo ruolo nel coordinare la trasduzione del segnale dipendente dai raft, RFTN2 è rilevante per studi sull’attivazione delle cellule immunitarie, sulla responsività agli antigeni e sulla modulazione delle vie infiammatorie. Alterazioni dell’espressione o della funzione sono di interesse nella ricerca meccanicistica sulla disregolazione immunitaria, anche in contesti legati all’autoimmunità e alla biologia delle malattie ematologiche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Raftlin-2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RFTN2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RFTN2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RFTN2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Raftlin-2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RFTN2 per lo studio della segnalazione di Raftlin-2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni RFTN2 critici per la funzione di Raftlin-2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RFTN2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Raftlin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Raftlin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RFTN2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Raftlin-2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Raftlin-2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RFTN2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RFTN2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.