Rad51 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400100-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rad51O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rad51 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rad51 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAD51. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rad51 Anticorpo (F-11): sc-398587
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rad51 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400100-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad51 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400100-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano RAD51 codifica a proteína Rad51, uma recombinase central que catalisa a busca por homologia e a troca de fitas de DNA durante a recombinação homóloga, permitindo o reparo de alta fidelidade de quebras de dupla fita do DNA e de forquilhas de replicação estagnadas. A Rad51 atua a jusante de BRCA1/BRCA2 e se coordena com RAD52, PALB2 e fatores associados à replicação para preservar a estabilidade do genoma ao longo das fases S e G2. Por meio de seus papéis nas respostas ao estresse replicativo, na recombinação meiótica e no reparo de DNA baseado em cromatina, a atividade de RAD51 influencia a sinalização de checkpoints e a troca entre cromátides-irmãs. A desregulação da expressão ou da função de RAD51 está ligada a fenótipos de instabilidade genômica e é frequentemente estudada no contexto da biologia tumoral, de defeitos hereditários de reparo de DNA e da sensibilidade a agentes que danificam o DNA em sistemas experimentais.
Rad51 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAD51 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAD51. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAD51. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAD51 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.