Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 27a Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419219-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 27aO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab 27a (m) e o Plasmídeo Double Nickase Rab 27a (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rab27a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 27a Anticorpo (E-8): sc-74586
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 27a Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419219-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab 27a Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419219-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rab27a codifica a pequena GTPase Rab27a, um regulador do tráfego de membranas que controla o ancoramento e a fusão de vesículas secretórias com a membrana plasmática. Em células de camundongo, Rab27a coordena a exocitose regulada por meio de interações com efetores como melanofilina, proteínas Slp/Exophilin e Munc13-4, sustentando processos que incluem o transporte de melanossomos, a liberação de grânulos citotóxicos e a secreção de grânulos densos de plaquetas. Essa via se cruza com o transporte vesicular dependente de actina, a biogênese de organelas relacionadas a lisossomos e a função da sinapse imune. A atividade desregulada de Rab27a tem sido associada a fenótipos de pigmentação e disfunção imunológica em modelos genéticos, tornando-o um ponto útil para estudar a dinâmica de vesículas e a homeostase de organelas.
Rab 27a O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rab27a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rab27a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rab27a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rab27a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.