QP-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423624

Visão geral

Uqcrq codifica a QP-C, uma pequena subunidade acessória do complexo III da cadeia respiratória mitocondrial (ubiquinol–citocromo c redutase) que auxilia a montagem e a estabilidade do complexo citocromo bc1 na membrana interna mitocondrial. Ao influenciar a transferência de elétrons do ubiquinol para o citocromo c, a QP-C contribui para a fosforilação oxidativa, a manutenção do potencial de membrana mitocondrial e o equilíbrio redox celular. A desregulação de componentes do complexo III pode comprometer a produção de ATP e elevar as espécies reativas de oxigênio (ROS) mitocondriais, associando processos dependentes de Uqcrq a respostas ao estresse bioenergético e à sinalização de apoptose. Em sistemas murinos, Uqcrq é, portanto, relevante para estudos mecanísticos de disfunção mitocondrial em tecidos metabolicamente ativos e para modelagem de vias implicadas em fenótipos neuromusculares e cardiometabólicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO QP-C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Uqcrq em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Uqcrq, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Uqcrq na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína QP-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Uqcrq para a investigação da sinalização de QP-C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Uqcrq críticos para a função QP-C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Uqcrq para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo QP-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo QP-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Uqcrq. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo QP-C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR QP-C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Uqcrq para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Uqcrq definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.