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PSMD1慢病毒激活颗粒(m) | sc-427651-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Psmd1 基因编码 PSMD1(Rpn2),它是 26S 蛋白酶体 19S 调节颗粒中必需的非 ATP 酶亚基,作为支架参与装配,并在泛素依赖性蛋白水解过程中支持底物识别与处理。通过泛素–蛋白酶体系统(UPS),PSMD1 参与蛋白质质量控制、细胞周期进程、DNA 损伤应答,以及包括通过 IκB 周转调控 NF-κB 在内的多种信号通路调节。蛋白酶体调节组分的扰动可破坏蛋白稳态,改变应激适应性转录程序,并影响抗原加工,使 PSMD1 的生物学功能与神经退行性变、炎症和肿瘤转化等相关机制相联系。在小鼠模型中,对 Psmd1 的调控为研究蛋白酶体调节结构及其对细胞稳态下游影响提供了一个可操作的平台。
PSMD1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Psmd1 表达。
PSMD1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Psmd1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PSMD1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Psmd1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。