Particules Lentivirales d'Activation (h) PSM: sc-401947-LAC

FOLH1 code l’antigène membranaire spécifique de la prostate (PSM), une métallopeptidase au zinc transmembranaire de type II dotée d’activités folate hydrolase et NAALADase, qui régulent le traitement extracellulaire des folates et la signalisation glutamatergique. La protéine influence l’absorption des nutriments et le métabolisme des neurotransmetteurs via le clivage des folates poly‑γ‑glutamylés et du N‑acétylaspartylglutamate, ce qui l’associe à la disponibilité des acides aminés et à l’homéostasie synaptique. L’expression de FOLH1 est fortement enrichie dans l’épithélium prostatique et est largement utilisée comme marqueur moléculaire dans les études de biologie de la prostate, tandis que son activité enzymatique dans les tissus neuronaux étaye les recherches sur la neurotransmission excitatrice et les processus neuroinflammatoires. Une expression et une activité dérégulées de FOLH1/PSM ont été associées à la biologie du cancer de la prostate ainsi qu’à des voies pertinentes pour la neurodégénérescence et le remodelage du microenvironnement associé aux tumeurs.

Les particules d'activation lentivirales PSM (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de FOLH1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales PSM (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription FOLH1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de PSM. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif FOLH1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.