Propidium Iodide (CAS 25535-16-4)

Lo ioduro di propidio (PI) è un colorante fluorescente che si lega agli acidi nucleici ed è ampiamente utilizzato in biologia cellulare per valutare la vitalità delle cellule o per analizzare le fasi del ciclo cellulare mediante citometria a flusso e microscopia a fluorescenza. Strutturalmente simile alla base dell'acido nucleico guanina, il PI è impermeabile alle cellule vive ma può penetrare nelle membrane cellulari di cellule morte o morenti dove si intercala tra le basi del DNA e, in misura minore, dell'RNA. Quando si lega agli acidi nucleici, la fluorescenza del PI viene significativamente aumentata, emettendo una fluorescenza rossa brillante sotto illuminazione, che lo rende uno strumento eccellente per identificare e quantificare le cellule necrotiche e apoptotiche. Il meccanismo d'azione prevede l'intercalazione del PI nelle aree a doppio filamento degli acidi nucleici; questa proprietà viene sfruttata nella ricerca per valutare l'integrità della membrana come marcatore di morte cellulare. Inoltre, il PI viene utilizzato insieme ad altri coloranti che legano il DNA nella citometria a flusso per valutare il contenuto di DNA delle cellule, facilitando così l'analisi delle fasi del ciclo cellulare, come le fasi G1, S e G2/M. L'emissione di fluorescenza distinta del PI a circa 617 nm ne consente l'uso in esperimenti di etichettatura multicolore, dove può essere combinato con altri fluorofori per la rilevazione simultanea di più bersagli cellulari, migliorando la profondità dell'analisi cellulare in ambienti di ricerca.