PRMT8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404371

概要

PRMT8（protein arginine methyltransferase 8）は膜結合型のI型PRMTであり、タンパク質基質上のアルギニン残基の非対称ジメチル化を触媒して、タンパク質間相互作用、細胞内局在、ならびにシグナル出力を調節します。PRMT8は、アルギニンメチル化によって形作られる細胞骨格ダイナミクス、小胞輸送、シグナル伝達経路と連動する翻訳後修飾ネットワークの制御に寄与します。PRMT8活性は神経およびシナプス関連プロセスの制御と関連しており、PRMTファミリーのメチル化プログラムの変化は、神経生物学、細胞分化、がん化シグナル伝達の文脈で頻繁に研究されています。さらに、アルギニンメチル化の破綻やPRMTに関連する基質リモデリングは、複数の疾患関連モデルで観察されるストレス応答やプロテオスタシスの変化における役割についても検討されています。

PRMT8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPRMT8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PRMT8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PRMT8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PRMT8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PRMT8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PRMT8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PRMT8の機能に不可欠なPRMT8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PRMT8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PRMT8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPRMT8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PRMT8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PRMT8 HDRプラスミド（h）および PRMT8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPRMT8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPRMT8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。