PRMT2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420951

Panoramica

Prmt2 codifica la proteina arginina metiltransferasi 2 (PRMT2), una PRMT di tipo I che catalizza la dimetilazione asimmetrica dei residui di arginina su istoni e su substrati non istonici, modulando la struttura della cromatina e la funzione proteica. L’attività di PRMT2 influenza la regolazione trascrizionale e la dinamica dei co-regolatori nelle vie di segnalazione dei recettori nucleari e in altri pathway, collegando la metilazione dell’arginina a programmi di espressione genica dipendenti dal contesto. Nei sistemi murini, PRMT2 è stata associata al controllo della proliferazione e della differenziazione cellulare, nonché alla regolazione dei geni dell’infiammazione tramite meccanismi epigenetici e post-traduzionali. La deregolazione delle reti di metilazione e trascrizione dipendenti da PRMT2 è stata implicata in processi rilevanti per la malattia, come la segnalazione associata ai tumori, le risposte allo stress metabolico e la disregolazione immunitaria, supportandone l’impiego come nodo meccanicistico negli studi di pathway.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PRMT2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Prmt2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Prmt2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Prmt2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PRMT2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Prmt2 per lo studio della segnalazione di PRMT2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Prmt2 critici per la funzione di PRMT2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Prmt2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PRMT2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal PRMT2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Prmt2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PRMT2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR PRMT2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Prmt2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Prmt2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.