PRMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420951
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRMT2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PRMT2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRMT2 Anticorpo (B-11): sc-393254
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420951 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Prmt2 codifica a proteína arginina metiltransferase 2 (PRMT2), uma PRMT do tipo I que catalisa a dimetilação assimétrica de resíduos de arginina em histonas e em substratos não histónicos, modulando a estrutura da cromatina e a função proteica. A atividade da PRMT2 influencia a regulação transcricional e a dinâmica de co-reguladores em recetores nucleares e noutras vias de sinalização, associando a metilação de arginina a programas de expressão génica dependentes do contexto. Em sistemas murinos, a PRMT2 tem sido associada ao controlo da proliferação celular, da diferenciação e da regulação de genes inflamatórios por mecanismos epigenéticos e pós-traducionais. Redes de metilação e de transcrição dependentes de PRMT2 desreguladas têm sido implicadas em processos relevantes para a doença, como sinalização associada a tumores, respostas ao stress metabólico e desregulação imunitária, sustentando a sua utilização como um nó mecanístico em estudos de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRMT2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prmt2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prmt2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prmt2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRMT2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prmt2 para a investigação da sinalização de PRMT2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prmt2 críticos para a função PRMT2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prmt2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PRMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PRMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prmt2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PRMT2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PRMT2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prmt2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prmt2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.