Prealbumin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401083-LAC

O TTR humano codifica a pré-albumina (transtirretina), uma proteína transportadora tetramérica secretada, produzida principalmente por hepatócitos e pelo plexo coroide, que transporta tiroxina (T4) e retinol indiretamente por meio da proteína ligadora de retinol. Como componente-chave do transporte endócrino e de vitamina A, o TTR contribui para a homeostase metabólica sistêmica e para processos de controle de qualidade proteica que influenciam a proteostase extracelular. Variantes de TTR propensas ao mau dobramento e a desestabilização associada ao envelhecimento estão ligadas à biologia da deposição amiloide, tornando o TTR um modelo amplamente utilizado para estudar secreção, estabilidade do tetrâmero e vias de agregação. Além disso, a expressão de TTR serve como marcador de diferenciação hepática e de função secretória em sistemas de fígado e de hepatócitos derivados de iPSC.

As Partículas de Ativação Lentivirais Prealbumin (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TTR numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Prealbumin (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TTR, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Prealbumin. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TTR e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.