PPARα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400238-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PPARαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PPARα (h) e o Plasmídeo Double Nickase PPARα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PPARA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PPARα Anticorpo (H-2): sc-398394
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PPARα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400238-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PPARα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400238-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPARA codifica o receptor ativado por proliferadores de peroxissoma alfa (PPARα), um receptor nuclear regulado por ligante que forma heterodímeros com o RXR para controlar a transcrição de genes envolvidos na captação de ácidos graxos, na β-oxidação e no metabolismo de lipoproteínas. O PPARα coordena a adaptação metabólica no fígado, coração, músculo esquelético e outros tecidos oxidativos, integrando sinais de nutrientes e lipídios às vias energéticas mitocondriais e peroxissomais. Por meio da regulação do processamento de lipídios, da cetogênese e do tônus inflamatório, o PPARα conecta o balanço energético celular às respostas ao estresse e à sinalização imunometabólica. Alterações na atividade de PPARA têm sido associadas à dislipidemia, a fenótipos de fígado gorduroso, à resistência à insulina e a aspectos mais amplos da biologia das doenças cardiometabólicas, tornando-o um alvo-chave para estudos mecanísticos da regulação metabólica.
PPARα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PPARA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PPARA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PPARA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PPARA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.