PORCN慢病毒激活颗粒(h): sc-413044-LAC

人类 PORCN 基因编码一种位于内质网的膜结合型 O-酰基转移酶，可催化 WNT 配体的棕榈油烯酰化（palmitoleoylation）。这种修饰是 WNT 分泌、与受体结合以及形成 WNT 浓度梯度所必需的。通过控制 WNT 配体的成熟过程，PORCN 调控经典的 β-连环蛋白（β-catenin）依赖性转录，以及非经典的 WNT/平面细胞极性（PCP）信号通路，从而影响细胞增殖、分化、极性建立和组织模式形成。PORCN 依赖的 WNT 信号受到扰动与多种发育障碍有关；在 WNT 通路活性失衡的疾病背景中也发挥作用，包括肿瘤和纤维化重塑。作为 WNT 配体生成过程中的上游限速节点，PORCN 是开展通路输出机制研究及旁分泌信号动力学研究的一个有价值靶点。

PORCN 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PORCN 表达。

PORCN 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在PORCN转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PORCN表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 PORCN 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。