PNPase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404406

개요

PNPT1은 폴리리보뉴클레오타이드 뉴클레오티딜트랜스퍼레이스 1(PNPase)을 암호화하며, 이는 미토콘드리아 막간 공간에서 3′–5′ 엑소리보뉴클레아제 활성과 RNA 감시에 관여하는 미토콘드리아 RNA 처리 효소입니다. PNPase는 소형 RNA의 유입과 turnover(분해·교체)를 조절하고 미토리보솜 기능을 형성함으로써 미토콘드리아 유전자 발현에 기여하며, 그 결과 산화적 인산화 능력과 세포 생체에너지 대사에 영향을 미칩니다. PNPT1의 기능 장애는 호흡사슬 활성 결함과, 손상된 미토콘드리아 RNA 대사와 연관된 스트레스 반응 변화 등을 포함한 미토콘드리아 기능 이상 표현형과 관련되어 왔습니다. 따라서 PNPT1은 미토콘드리아 RNA 항상성, 비정상 RNA 종에 의해 유발되는 선천면역 신호전달, 그리고 신경발달 및 대사 질환과 관련된 기전들을 잇는 경로에서 자주 연구됩니다.

PNPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PNPT1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PNPT1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PNPT1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PNPase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PNPase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PNPT1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PNPase 기능에 중요한 PNPT1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PNPT1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PNPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PNPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PNPT1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PNPase HDR 플라스미드 (h) 및 PNPase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PNPT1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PNPT1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.