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PLSCR1双切口酶质粒(h) | sc-402203-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PLSCR1双切口酶质粒(h2) | sc-402203-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLSCR1(磷脂扰乱酶1)是一种受钙调控的膜相关蛋白,被认为参与磷脂在质膜两侧的双向转位,从而影响膜的不对称性以及依赖脂质的信号传导。它参与干扰素刺激基因网络,并可调节与先天免疫、细胞凋亡和囊泡运输相关的细胞反应。PLSCR1 还与影响细胞生长和分化的通路有关,常在炎症信号失衡和致癌表型等研究背景中被重点关注。多种与疾病相关的转录组特征中都报道了 PLSCR1 表达或功能的改变,因此它是开展膜动力学与干扰素驱动程序机制研究的有用靶点。
PLSCR1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PLSCR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PLSCR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PLSCR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PLSCR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。