PITSLRE A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402476

概要

CDK11Bは、PITSLRE Aと呼ばれるサイクリン依存性キナーゼをコードしており、細胞周期の進行と転写制御の協調に関与するセリン／スレオニン型タンパク質キナーゼであるとされています。PITSLRE Aは、転写因子やスプライソソーム関連因子との相互作用を介してRNAプロセシングおよびpre-mRNAスプライシングの制御に関与し、増殖に必要な遺伝子発現プログラムを支えることが示唆されています。増殖中のヒト細胞において、CDK11ファミリーの活性は、しばしば有糸分裂の制御、ストレス応答、プロテオスタシスの維持といった文脈で研究されています。CDK11関連ネットワークの制御異常は、細胞周期やRNA代謝の変化が病的表現型に寄与する複数の疾患関連状況で観察されており、CDK11Bはメカニズム解明研究に有用な結節点（ノード）となります。

PITSLRE A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDK11B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDK11B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDK11Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PITSLRE Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PITSLRE Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDK11B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PITSLRE Aの機能に不可欠なCDK11Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDK11Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PITSLRE A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPITSLRE A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDK11B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PITSLRE A HDRプラスミド（h）および PITSLRE A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDK11Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDK11B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。