Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PiT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403121-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PiT1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PiT1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PiT1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC20A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PiT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403121-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PiT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403121-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC20A1 codifica a PiT1, um transportador de fosfato inorgânico (Pi) de alta afinidade, dependente de sódio, que sustenta a captação celular de fosfato necessária para a síntese de ATP, o metabolismo de nucleotídeos e a produção de fosfolipídios de membrana. Para além do transporte de solutos, a PiT1 contribui para programas de homeostase do fosfato que se conectam com a sinalização proliferativa, a adaptação metabólica e a progressão do ciclo celular em diversos tipos celulares. Alterações na atividade de SLC20A1/PiT1 têm sido investigadas em contextos como distúrbios no manejo de minerais, processos associados à calcificação e fenótipos sensíveis ao fosfato relevantes para o câncer e a remodelação tecidual. Essas características fazem da PiT1 um ponto útil para estudos mecanísticos de sinalização induzida por fosfato e de controle metabólico em células humanas.
PiT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC20A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC20A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC20A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC20A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.