PIEZO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410555-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PIEZO1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PIEZO1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PIEZO1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PIEZO1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PIEZO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410555-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PIEZO1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410555-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PIEZO1 codifica um canal catiônico mecanossensível e não seletivo que converte a tensão da membrana e o estresse de cisalhamento em influxo de Ca²⁺, permitindo que as células percebam e respondam a estímulos mecânicos. A atividade de PIEZO1 regula processos como controle do volume celular, homeostase iônica, remodelamento do citoesqueleto e vias de mecanotransdução que influenciam migração, adesão e sinalização endotelial. Em contextos hematológicos e vasculares, a sinalização de Ca²⁺ mediada por PIEZO1 contribui para a hidratação e a deformabilidade das hemácias e para respostas dependentes do fluxo em células endoteliais. Alterações genéticas e funcionais em PIEZO1 têm sido associadas a distúrbios da fisiologia dos eritrócitos e do desenvolvimento linfático/vascular, tornando-o um alvo relevante para dissecar redes de sinalização reguladas por estímulos mecânicos.
PIEZO1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PIEZO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PIEZO1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PIEZO1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PIEZO1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.