PHF8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407306

概要

PHF8はJmjCドメインを含むヒストン脱メチル化酵素をコードしており、PHDフィンガーを介してH3K4me3を認識し、H3K9me2/1やH4K20me1といった抑制的なリジンメチル化マークを除去することで、クロマチンのアクセス性を調節します。転写のエピジェネティック制御を通じて、PHF8は細胞周期の進行、DNA損傷応答、ならびに系譜特異的な分化プログラムに寄与します。PHF8の機能は、発生過程における遺伝子発現ネットワークを形成するクロマチンリモデリングおよび転写制御経路と交差しています。PHF8の制御異常や変異は、神経発達に関わる表現型や、がん関連のエピジェネティック再プログラミングで観察される転写状態の変化と関連づけられています。

PHF8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPHF8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PHF8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PHF8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PHF8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PHF8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PHF8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PHF8の機能に不可欠なPHF8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PHF8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PHF8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPHF8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PHF8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PHF8 HDRプラスミド（h）および PHF8 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPHF8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPHF8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。