Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PFKL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402662
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PFKL O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PFKL, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PFKL Anticorpo (A-6): sc-393713
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PFKL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402662 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PFKL codifica a isoforma hepática da fosfofrutoquinase-1 (PFK-1), uma enzima-chave e limitante da velocidade que catalisa a conversão de frutose-6-fosfato em frutose-1,6-bisfosfato na glicólise. Ao integrar sinais alostéricos do estado energético e metabólico celular, a PFKL ajuda a coordenar o fluxo glicolítico com as demandas biossintéticas e o equilíbrio redox. Alterações na atividade e na expressão de PFKL têm sido associadas à reprogramação metabólica em estados proliferativos, contribuindo para mudanças no uso de glicose, na produção de lactato e no direcionamento do carbono em vias a jusante. Como um nó central da glicólise, a PFKL é frequentemente investigada em estudos de homeostase energética, adaptação ao estresse e dependências metabólicas relevantes para fenótipos associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PFKL (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PFKL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PFKL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PFKL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PFKL.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PFKL para a investigação da sinalização de PFKL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PFKL críticos para a função PFKL
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PFKL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PFKL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PFKL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PFKL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PFKL Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PFKL (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PFKL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PFKL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.