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Peg10慢病毒激活颗粒(h) | sc-406028-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 PEG10 基因编码 Peg10 蛋白,这是一种由驯化的逆转座子衍生、类似 gag/pol 的蛋白,具有 RNA 结合与转录后调控功能,并在细胞生长、生存以及谱系程序中发挥重要作用。Peg10 的活性与泛素介导的蛋白质稳态调控、细胞周期控制以及塑造增殖与分化的信号网络相互交织,在胎盘发育等生物学情境中尤为突出。PEG10 表达失调已在多种与疾病相关的模型中与凋亡阈值改变及侵袭性表型相关,因此成为研究转录调控与致癌应激反应的一个有价值节点。在生物医学研究中,PEG10 也是一个便于操作的靶点,可用于探究内源性基因激活对细胞状态、通路参与以及下游转录组重塑的影响。
Peg10 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PEG10 表达。
Peg10 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PEG10转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Peg10表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PEG10 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。