Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) PDE5A: sc-433880-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PDE5A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PDE5A Double Nickase (m) et le plasmide PDE5A Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pde5a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PDE5A Antibody (D-3): sc-398747
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PDE5A | sc-433880-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) PDE5A | sc-433880-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Pde5a* code la phosphodiestérase 5A (PDE5A), une phosphodiestérase spécifique du cGMP qui met fin à la signalisation oxyde nitrique–cGMP en hydrolysant le cGMP en GMP. En contrôlant les niveaux intracellulaires de cGMP, PDE5A régule l’activité de la protéine kinase G (PKG) et des processus en aval, notamment le tonus du muscle lisse, la réactivité vasculaire, la fonction plaquettaire et la signalisation des cardiomyocytes. L’activité de PDE5A s’intègre aux voies des peptides natriurétiques et de la guanylate cyclase soluble, façonnant un dialogue croisé entre nucléotides cycliques qui influence l’homéostasie cellulaire. Une expression altérée de PDE5A ou un déséquilibre de la voie du cGMP a été étudié dans des modèles de remodelage cardiovasculaire, de dysfonction vasculaire pulmonaire et de régulation neurovasculaire.
PDE5A Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pde5a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pde5a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pde5a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pde5a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.