Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PDE5A Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-433880-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDE5AO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDE5A (m) e o Plasmídeo Double Nickase PDE5A (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Pde5a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDE5A Anticorpo (D-3): sc-398747
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDE5A Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-433880-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDE5A Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-433880-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Pde5a de camundongo codifica a fosfodiesterase 5A (PDE5A), uma fosfodiesterase específica para cGMP que encerra a sinalização óxido nítrico–cGMP ao hidrolisar cGMP em GMP. Ao controlar os níveis intracelulares de cGMP, a PDE5A regula a atividade da proteína quinase G (PKG) e processos a jusante, incluindo o tônus do músculo liso, a reatividade vascular, a função plaquetária e a sinalização em cardiomiócitos. A atividade da PDE5A integra-se às vias do peptídeo natriurético e da guanilil ciclase solúvel, moldando a comunicação cruzada entre nucleotídeos cíclicos que influencia a homeostase celular. Alterações na expressão de PDE5A ou desequilíbrios na via do cGMP têm sido investigados em modelos de remodelamento cardiovascular, disfunção vascular pulmonar e regulação neurovascular.
PDE5A O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pde5a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pde5a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pde5a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pde5a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.