Pdcd-1 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-403008-LAC-2

ヒトPDCD1は抑制性免疫チェックポイント受容体であるPD-1（Pdcd-1）をコードしており、PD-1は活性化T細胞、B細胞、および一部の骨髄系細胞サブセットに発現するI型膜タンパク質で、抗原受容体シグナル伝達を抑制することで末梢免疫寛容の維持に寄与する。PD-L1またはPD-L2が結合すると、PD-1はITIM/ITSMモチーフを介してSHP2ホスファターゼをリクルートし、TCR/CD28の近位シグナルを減弱させることでPI3K–AKTおよびRAS–MAPK経路の活性を制限し、エフェクター機能、代謝、疲弊に関連する転写プログラムを再編成する。PDCD1の発現やシグナル伝達の異常は、慢性感染や腫瘍関連の免疫機能障害に加えて自己免疫とも関連し、免疫活性化と抑制のバランスを調節するうえでの中心的役割を反映している。PDCD1を標的とした遺伝子編集や摂動（perturbation）研究は、一次ヒトリンパ球および工学的に構築したin vitroモデルにおいて、チェックポイントシグナル伝達の機序、免疫細胞の運命決定、ならびにリガンド依存的な抑制ネットワークを機構的に解明することを可能にする。

Pdcd-1 レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なPDCD1の発現上昇を可能にします。

Pdcd-1 レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、PDCD1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Pdcd-1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のPDCD1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。