PCPE-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411925
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PCPE-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PCPE-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PCPE-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-411925 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PCOLCE2 codifica a proteína potencializadora 2 da C-endopeptidase do procolágeno (PCPE-2), uma glicoproteína associada à matriz extracelular que aumenta o processamento, por BMP1/proteinases do tipo tolloid, dos C-propeptídeos do procolágeno, promovendo assim a fibrilogênese do colágeno e a maturação da matriz. Ao modular a deposição e a renovação do colágeno, a PCPE-2 contribui para programas de remodelamento tecidual ligados à ativação de fibroblastos, ao reparo de feridas e à regulação da mecânica do estroma. Alterações na expressão de PCOLCE2 ou na atividade da PCPE-2 têm sido implicadas no remodelamento fibrótico e em outras patologias caracterizadas por desregulação da organização da matriz extracelular. Em sistemas humanos, a PCPE-2 é, portanto, um alvo útil para investigar vias de biossíntese do colágeno e a comunicação cruzada (“crosstalk”) de sinalização dirigida pela matriz.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PCPE-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PCOLCE2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PCOLCE2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PCOLCE2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PCPE-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PCOLCE2 para a investigação da sinalização de PCPE-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PCOLCE2 críticos para a função PCPE-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PCOLCE2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PCPE-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PCPE-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PCOLCE2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PCPE-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PCPE-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PCOLCE2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PCOLCE2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.