PCID2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406324

Visão geral

PCID2 (PCI domain containing 2) codifica uma proteína com domínio PCI implicada na montagem e na regulação de grandes complexos multiproteicos que coordenam o metabolismo de RNA e o controle da expressão gênica. O PCID2 tem sido associado a processos regulatórios pós-transcricionais, incluindo a vigilância e a degradação (turnover) de mRNA, e é estudado no contexto de vias associadas à proteostase que moldam a homeostase celular. A perturbação desses processos pode influenciar a progressão do ciclo celular, as respostas ao estresse e programas de diferenciação ao alterar a estabilidade dos transcritos e a produção de proteínas. Redes desreguladas de processamento de RNA e controle de qualidade são frequentemente associadas a estados oncogênicos e a outras doenças complexas, tornando o PCID2 um alvo útil para estudos mecanísticos dos circuitos de regulação gênica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PCID2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PCID2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PCID2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PCID2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PCID2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PCID2 para a investigação da sinalização de PCID2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PCID2 críticos para a função PCID2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PCID2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PCID2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PCID2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PCID2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PCID2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PCID2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PCID2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PCID2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.