PCDH17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405740

概要

PCDH17（プロトカドヘリン17）は、プロトカドヘリンファミリーに属するカルシウム依存性の細胞間接着分子であり、とりわけ神経系における組織構築の確立と維持に関与すると考えられています。形質膜上でのホモフィリックな相互作用を介して、PCDH17は神経突起の伸長、シナプス結合性、回路形成を形作る細胞選別プロセスに寄与します。PCDH17に関連する接着ダイナミクスは、細胞骨格リモデリングや、RhoファミリーGTPase関連プロセスを含む移動・分化を制御するシグナル伝達経路とも交差します。PCDH17の発現異常やエピジェネティックなサイレンシングは複数の腫瘍文脈で報告されており、接着の変化、浸潤性の挙動、系譜特異的な転写プログラムにおける役割が研究されています。

PCDH17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPCDH17遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PCDH17内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PCDH17のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PCDH17タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PCDH17シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PCDH17欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PCDH17の機能に不可欠なPCDH17エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PCDH17ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PCDH17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPCDH17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PCDH17遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PCDH17 HDRプラスミド（h）および PCDH17 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPCDH17ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPCDH17標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。