PATZ1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-404881-LAC

PATZ1 (proteína de dedo de zinco 1 contendo POZ/BTB e AT-hook) é um fator de transcrição nuclear que se liga a DNA rico em AT e interage com complexos reguladores da cromatina para modular programas de expressão gênica que controlam proliferação, diferenciação e apoptose. Por meio do seu domínio BTB/POZ e dos módulos de ligação ao DNA do tipo dedo de zinco, o PATZ1 participa tanto da repressão quanto da ativação transcricional, influenciando o controle do ciclo celular, o comprometimento de linhagem e vias responsivas ao estresse. Alterações na expressão ou na função de PATZ1 têm sido associadas a fenótipos oncogênicos e do desenvolvimento, incluindo redes transcricionais desreguladas que afetam a biologia tumoral e a plasticidade celular. Como regulador dependente do contexto, o PATZ1 oferece um ponto de partida útil para dissecar circuitos dirigidos por fatores de transcrição, controle epigenético e a robustez de redes gênicas em células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais PATZ1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de PATZ1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais PATZ1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição PATZ1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de PATZ1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo PATZ1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.