PANK2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-405120-NIC

판토텐산 키나아제 2(PANK2)는 미토콘드리아 효소로, 판토텐산으로부터 조효소 A(CoA)를 생합성하는 과정에서 첫 번째이자 속도 제한 단계(율속 단계)를 촉매합니다. 이를 통해 비타민 B5의 이용 가능성과 세포 내 아실-CoA 생성 및 에너지 대사를 연결합니다. CoA 풀을 조절함으로써 PANK2는 미토콘드리아 기능, 지질 대사, 레독스 항상성에 영향을 미치며, 그 결과 지방산 β-산화와 TCA(시트르산) 회로 같은 경로에도 하위 수준의 영향을 줍니다. PANK2의 활성이나 발현이 조절 이상을 보이면 대사 플럭스가 변하고 미토콘드리아 스트레스가 증가하는 것과 연관되며, PANK2는 판토텐산 키나아제 관련 신경퇴행(PKAN)을 포함한 신경퇴행 및 철 처리(iron-handling) 표현형 맥락에서 폭넓게 연구되어 왔습니다. 이러한 특성 때문에 PANK2는 인간 세포 시스템에서 미토콘드리아 대사 조절과 스트레스 반응성 신호전달을 탐구하는 데 유용한 표적입니다.

PANK2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 PANK2 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 PANK2 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 PANK2의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, PANK2 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.