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PADI4慢病毒激活颗粒(m) | sc-422177-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
PADI4慢病毒激活颗粒(m2) | sc-422177-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Padi4 基因编码肽基精氨酸脱亚氨酶 4(PADI4),这是一种钙依赖性酶,能够催化组蛋白及其他核内蛋白上精氨酸残基的瓜氨酸化。通过这种翻译后修饰,PADI4 可影响染色质结构、转录调控,以及在免疫和上皮环境中对细胞状态程序的表观遗传控制。PADI4 活性与先天免疫信号和炎症过程相关,包括调控中性粒细胞胞外诱捕网(NET)形成,并调节细胞因子应答基因的表达。瓜氨酸化失衡与自身免疫及炎症性疾病机制有关,因此 Padi4 是解析染色质重塑与免疫激活之间联系通路的一个有用靶点。
PADI4 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Padi4 表达。
PADI4 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Padi4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PADI4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Padi4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。