Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p130 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422615
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p130 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p130, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p130 Anticorpo (A-10): sc-374521
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p130 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422615 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Rbl2 de camundongo codifica a proteína semelhante ao retinoblastoma p130 (RBL2), uma proteína do tipo “pocket” que atua em parceria com os complexos E2F4/5 e DREAM para reprimir a transcrição e impor a saída do ciclo celular. A p130 integra sinais da atividade de CDK-ciclina e da remodelação dependente de fosforilação dos complexos da família RB para regular a transição G0/G1, a quiescência e programas de diferenciação. Por essas vias, Rbl2 influencia o controle de checkpoints, a repressão associada à cromatina e a estabilidade de linhagem, tornando-se relevante para estudos sobre controle de proliferação e desregulação oncogênica. Alterações na função da via de RB que perturbam a repressão de E2F mediada por p130 são frequentemente investigadas em modelos de câncer, senescência e homeostase tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p130 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rbl2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rbl2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rbl2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p130.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rbl2 para a investigação da sinalização de p130, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rbl2 críticos para a função p130
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rbl2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p130 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo p130 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rbl2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p130 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR p130 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rbl2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rbl2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.