ORP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409871-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ORP-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ORP-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ORP-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para OSBPL3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ORP-3 Anticorpo (G-5): sc-514097
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ORP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409871-NIC | 20 µg | $410.00 |
OSBPL3 codifica a proteína 3 relacionada às proteínas ligantes de oxisteróis (ORP-3), uma proteína de transferência de lipídios que atua em sítios de contato entre membranas para coordenar a sinalização de esteróis e fosfoinositídeos entre organelas. A ORP-3 tem sido associada à regulação do remodelamento do citoesqueleto de actina, da dinâmica de adesões focais e da transdução de sinais induzida por receptores por meio de vias que incluem o metabolismo de PI4P/PI(4,5)P2 e programas downstream de GTPases da família Rho. Ao acoplar a homeostase lipídica ao tráfego de membranas e à motilidade celular, a ORP-3 oferece um ponto de entrada mecanístico para estudar como o sensoriamento de lipídios influencia estados de sinalização dependentes de adesão. A desregulação da expressão de OSBPL3 foi relatada em múltiplos contextos de doença e é frequentemente investigada em estudos de sinalização proliferativa, fenótipos associados à invasão e remodelamento de membranas adaptativo ao estresse.
ORP-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus OSBPL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de OSBPL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função OSBPL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com OSBPL3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.