Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Orai1 Antibody (G-2): sc-377281. Near-infrared western blot analysis of Orai1 expression in human testis tissue extract. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181.
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Orai1双切口酶质粒(h): sc-400901-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Orai1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Orai1双切酶质粒（h）和Orai1双切酶质粒（h2）编码针对ORAI1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Orai1: sc-377281，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Orai1双切口酶质粒(h) | sc-400901-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Orai1双切口酶质粒(h2) | sc-400901-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ORAI1 编码 Orai1 蛋白，它是钙释放激活钙（CRAC）通道的成孔亚基。在内质网 Ca²⁺ 储存被耗竭后，CRAC 通道介导储存操纵性 Ca²⁺ 内流（store-operated Ca²⁺ entry, SOCE）。Orai1 与 STIM1 协同作用，将内质网对 Ca²⁺ 的感知与质膜通道开启相耦联，从而塑造胞质钙信号；这些信号调控 NFAT 依赖的转录、细胞激活程序以及钙稳态。该通路是免疫细胞信号转导与分泌的核心，也参与增殖、迁移等更广泛的钙调控过程。ORAI1 活性失衡与免疫功能障碍和炎症表型相关；Ca²⁺ 内流信号的异常也在肌病及癌症相关信号网络等情境中受到研究。
Orai1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ORAI1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ORAI1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ORAI1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ORAI1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。