OLFML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404425

概要

OLFML3（olfactomedin-like 3）は、オルファクトメジンファミリーに属する分泌型の細胞外マトリックス（ECM）関連糖タンパク質をコードしており、細胞—マトリックス相互作用や組織リモデリングに関与するとされています。間質系および血管系の文脈で発現し、血管新生プログラムの制御、線維芽細胞様の挙動、ならびに細胞外のシグナルキューへの影響を介した炎症性微小環境の調節との関連が報告されています。OLFML3の活性は、ECMの組織化、細胞移動、内皮—間質クロストークを司る経路と交差しており、これらは腫瘍進展や線維化リモデリングの過程でしばしば変化するプロセスです。OLFML3発現の異常は複数のがんや血管関連病態で報告されており、微小環境に駆動される表現型を研究するうえでの機序的ハブとしての有用性が示唆されます。

OLFML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるOLFML3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OLFML3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OLFML3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OLFML3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OLFML3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OLFML3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OLFML3の機能に不可欠なOLFML3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OLFML3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OLFML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOLFML3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OLFML3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OLFML3 HDRプラスミド（h）および OLFML3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOLFML3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOLFML3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。